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一種快速方便轉(zhuǎn)基因插入位點(diǎn)鑒定技術(shù)

時(shí)間:2026-04-09    作者:admin 點(diǎn)擊: ( 2 ) 次

【摘要】 本發(fā)明公開(kāi)了一種確定轉(zhuǎn)基因插入位點(diǎn)的方法,其特點(diǎn)為通過(guò)限制性內(nèi)切酶消化,接頭連接和PCR等簡(jiǎn)單易行的步驟獲得位于載體與接頭之間的基因組DNA序列而確定轉(zhuǎn)基因插入位點(diǎn)。本發(fā)明的方法可用于確定外源基因整合位點(diǎn)及附近的基因組序列以及進(jìn)行轉(zhuǎn)基因表達(dá)與表型的因果關(guān)系分析等。 【專(zhuān)利類(lèi)型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】王鑄鋼 【申請(qǐng)人類(lèi)型】個(gè)人 【申請(qǐng)人地址】200023上海市南塘浜路133號(hào)1605室 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】上海市 【申請(qǐng)人區(qū)縣】黃浦區(qū) 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610023132.1 【申請(qǐng)日】2006-01-06 【申請(qǐng)年份】2006 【公開(kāi)公告號(hào)】CN1995384A 【公開(kāi)公告日】2007-07-11 【公開(kāi)公告年份】2007 【IPC分類(lèi)號(hào)】C12Q1/68; C12N15/63 【發(fā)明人】王鑄鋼 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1.一種確定轉(zhuǎn)基因插入位點(diǎn)的方法,其特征在于,包括步驟: (a)對(duì)于待確定轉(zhuǎn)基因插入位點(diǎn)的基因組DNA,用限制性內(nèi)切酶進(jìn)行消化, 從而獲得消化后的基因組片段,然后在消化后的基因組片段兩端連接接頭,從 而形成在兩端帶有接頭的基因組片段; (b)以載體序列特異性引物和接頭序列特異性引物,對(duì)步驟(a)中兩 端帶有接頭的基因組片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增,從而獲得PCR產(chǎn)物,其中所述 的PCR產(chǎn)物對(duì)應(yīng)于位于載體與接頭之間的基因組DNA序列; (c)對(duì)步驟(b)中的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序; (d)根據(jù)步驟(c)的測(cè)序結(jié)果,確定轉(zhuǎn)基因的插入位點(diǎn)。 【當(dāng)前權(quán)利人】王鑄鋼 【當(dāng)前專(zhuān)利權(quán)人地址】上海市南塘浜路133號(hào)1605室 【被引證次數(shù)】14 【被他引次數(shù)】14.0 【家族被引證次數(shù)】14

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    發(fā)布時(shí)間:2026-04-09

    【專(zhuān)利類(lèi)型】外觀設(shè)計(jì)【申請(qǐng)人】上海環(huán)達(dá)計(jì)算機(jī)科技有限公司; 神達(dá)電腦股份有限公司【申請(qǐng)人類(lèi)型】企業(yè)【申請(qǐng)人地址】200436上海市閘北區(qū)江場(chǎng)三路213號(hào)【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó)【申請(qǐng)人城市】上海市【申請(qǐng)人區(qū)縣】靜安區(qū)【申請(qǐng)?zhí)枴緾N20063003

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