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一種大孔樹脂用于細(xì)菌多糖中內(nèi)毒素去除的方法

時(shí)間:2026-04-09    作者:admin 點(diǎn)擊: ( 2 ) 次

【摘要】 本發(fā)明一種大孔樹脂用于細(xì)菌多糖中內(nèi)毒素去 除的方法,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,其步驟為:利用生物反應(yīng)器對 細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),制備粗糖,粗糖經(jīng)冷酚抽提去蛋白,用鈣 離子螯合劑-表面活性劑混合緩沖液進(jìn)行超濾后,用大孔樹脂 吸附去除內(nèi)毒素,獲得內(nèi)毒素含量低的細(xì)菌多糖。本發(fā)明獲得 的內(nèi)毒素含量低的細(xì)菌多糖適合于制備細(xì)菌多糖疫苗及細(xì)菌 多糖結(jié)合疫苗。。(macrodatas.cn) (來 自 馬 克 數(shù) 據(jù) 網(wǎng)) 【專利類型】發(fā)明申請 【申請人】云南沃森生物技術(shù)有限公司 【申請人類型】企業(yè) 【申請人地址】650106云南省昆明市云南省昆明市高新區(qū)云南省大學(xué)科技園2期A3幢4樓 【申請人地區(qū)】中國 【申請人城市】昆明市 【申請?zhí)枴緾N200610048878.8 【申請日】2006-12-06 【申請年份】2006 【公開公告號】CN1970780A 【公開公告日】2007-05-30 【公開公告年份】2007 【授權(quán)公告號】CN100540676C 【授權(quán)公告日】2009-09-16 【授權(quán)公告年份】2009.0 【發(fā)明人】黃鎮(zhèn); 向左云 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種大孔樹脂用于細(xì)菌多糖中內(nèi)毒素去除的方法,其步驟是: (1)采用生物反應(yīng)器對細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng); (2)于對數(shù)生長后期殺菌后,離心收集上清液; (3)在上清液中加入十六烷基三甲基溴化銨,離心收集沉淀; (4)沉淀中加入1mol/LCaCl2溶液解離,加入乙醇至終濃度25%,離心收集上清液; (5)上清液加入乙醇至50~90%;離心收集多糖沉淀; (6)多糖沉淀分別用無水乙醇、丙酮各洗滌2次; (7)洗滌后的多糖經(jīng)冷凍干燥獲得粗制多糖; (8)粗糖按5~50mg/ml溶解于1/10飽和中性醋酸鈉溶液中,用冷酚萃取1~10次, 離心收集上清液; (9)上清液采用含1~15%鈣離子螯合劑與0.1~2.0%表面活性劑的混合緩沖液超濾; (10)在超濾濃縮液中加入預(yù)處理的大孔樹脂,吸附4~8小時(shí); (11)2000~5000rpm的條件下離心10~60分鐘,收集上清液; (12)上清液采用注射用水,3~300KD膜進(jìn)行超濾; (13)超濾濃縮液中加入CaCl2溶液至終濃度0.1-2mol/L,乙醇濃度20~30%進(jìn)行沉 淀,離心收集上清液; (14)上清液采用3~300KD膜進(jìn)行超濾; (15)超濾后液加入CaCl2或NaCl溶液至終濃度0.1-2mol/L,乙醇溶液至終濃度50-90% 沉淀多糖,離心收集多糖沉淀; (16)多糖沉淀分別用無水乙醇、丙酮各洗滌2次; (17)洗滌的多糖經(jīng)冷凍干燥,獲得內(nèi)毒素含量低的精制多糖。 【當(dāng)前權(quán)利人】玉溪沃森生物技術(shù)有限公司 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】云南省玉溪市紅塔區(qū)高新區(qū)東風(fēng)南路83號 【被引證次數(shù)】TRUE 【家族被引證次數(shù)】TRUE

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